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凱杰qiagen質粒提取試劑盒實驗原理

 更新時間:2024-08-28 點擊量:335

一、凱杰Qiagen介紹

QIAGEN是一家專業(yè)化致力于生物分子樣品制備解決方案的跨國經(jīng)營企業(yè),總部位于德國。1984年,QIAGEN在德國成立,1996年在美國紐約納斯達克上市。QIAGEN擁有超過1000項zhuanli和認可證明,在18個國家設立了分公司,代理商服務國超過40個,在全球有超過400000的用戶。QIAGEN提供的產(chǎn)品超過500類,包括各種試劑,耗材和自動化純化工作站。這些產(chǎn)品用于樣品采集,穩(wěn)定,核酸或蛋白的分離,純化和檢測中,不僅廣泛的應用于科研領域的各個方面,在生物技術,制藥,法醫(yī)研究,食品安全檢測,畜牧業(yè)分子診斷領域也得到了廣泛的應用。QIAGEN產(chǎn)品的zuo越品質和在應用中的出色表現(xiàn)使得其成為樣品處理中標準的代名詞。

二、凱杰qiagen質粒提取試劑盒實驗原理

?Qiagen質粒提取試?劑盒的實驗原理?主要基于細菌的培養(yǎng)、收獲和裂解,以及隨后通過特定的緩沖液和操作步驟來純化質粒DNA。這個過程涉及幾個關鍵步驟,包括細菌的培養(yǎng)、收獲、裂解,以及質粒DNA的純化。

1.  ?細菌的培養(yǎng)?:首先,從瓊脂平板上挑取一個單菌落,接種到含有適當抗生素的LB液體培養(yǎng)基中,并在特定條件下培養(yǎng),以便質粒DNA能夠自主復制。

2. ?細菌的收獲和裂解?:通過離心收集細菌,然后使用特定的緩沖液(如Buffer P1)重懸細菌。接著添加Buffer P2并劇烈晃動以裂解細菌,這一步中SDS(十二烷基硫酸鈉)起到變性蛋白質的作用,促進細胞壁的裂解。隨后加入冰浴的Buffer P3,通過離心和過濾步驟去除細胞碎片和未裂解的細胞。 

3. ?質粒DNA的純化?:經(jīng)過上述步驟后,質粒DNA被釋放到溶液中。通過使用QIAGEN-tip進行進一步的純化,利用特定的緩沖液(如Buffer QBT、Buffer QCBuffer QN)進行洗滌和洗脫,最終得到較為純凈的質粒DNA。

這個過程的關鍵在于使用特定的緩沖液和操作步驟來最大限度地提取質粒DNA,同時去除雜質,如蛋白質和基因組DNA,以確保獲得高質量的質粒產(chǎn)品。此外,通過加入異丙醇和乙醇進行沉淀和清洗,進一步提高了質粒DNA的純度和濃度。

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?

三、凱杰qiagen質粒提取試劑盒目錄表

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

12362

EndoFree Plasmid Maxi Kit (10)

10T

12381

EndoFree Plasmid Mega Kit (5)

5T

12391

EndoFree Plasmid Giga Kit (5)

5T



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